液相色譜儀HPLC的化學發(fā)光檢測器原理：化學發(fā)光是指在沒有任何光、電、熱的作用下，只是由于反應體系中某種物質(反應物、產物、中間體或熒光物質)的分子吸收了反應所釋放的能量而由基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài),然后再從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)，同時將能量以光輻射的形式釋放出來，產生化學發(fā)光的現象。在固相、液相、氣相反應中均能觀察到化學發(fā)光。

由于物質激發(fā)態(tài)的能量是來自化學反應，故叫作化學發(fā)光。當分離組分從色譜柱中洗脫出來后，立即與適當的化學發(fā)光試劑混合，引起化學反應，導致發(fā)光物質產生輻射，其光強度與該物質的濃度成正比。

液相色譜儀HPLC的化學發(fā)光檢測器不需要光源，也不需要復雜的光學系統，只要有恒流泵，將化學發(fā)光試劑以一定的流速泵入混合器中，使之與柱流出物迅速而又均勻地混合產生化學發(fā)光，通過光電倍增管將光信號變成電信號，就可進行檢測。這種檢測器的最小檢出量可達10～12g。

化學發(fā)光反應的兩個關鍵步驟: 激發(fā)和發(fā)射。

第一是反應必須能夠提供足夠的激發(fā)能。通常只有那些反應速度相當快的放能反應，其焙變介于170-300kJ/mol之間，才能在可見光范圍內觀察到化學發(fā)光現象。

第二是化學反應的能量至少能被一種物質所接受并產生激發(fā)態(tài)。

第三是處于激發(fā)態(tài)的分子或原子能夠釋放出光子或者將其能量轉移給另一個分子，使此分子激發(fā)，然后以輻射光子的形式回至基態(tài)。

化學反應要產生化學發(fā)光需滿足的條件:

第一，該反應必須能夠提供足夠的能量且可以被某種反應產物或是中間體吸收，使之處于激發(fā)態(tài)，在許多氧化還原反應中所提供的能量都能滿足此條件，因此大多數氧化還原反應都是化學發(fā)光反應;

第二，化學反應的能量至少能被一種物質所接受并使之生成激發(fā)態(tài)。對于有機分子的液相化學發(fā)光而言，從能量上看，容易生成激發(fā)態(tài)產物的往往是一些芳香族化合物和撥基化合物;

第三，處于激發(fā)態(tài)的分子或原子必須具有一定的化學發(fā)光量子效率使其能釋放出光子，或者能夠轉移它的能量給另一個分子使之進入激發(fā)態(tài)并釋放出光子。由此可見，能夠用于HPLC柱后檢測的化學發(fā)光是由一些高能量、不放熱、不做電功或其它功的化學反應所釋放的能量，去激發(fā)體系中某些化學物質分子而產生的次級光發(fā)射, 利用產生的化學發(fā)光來對經色譜分離的被分析化合物進行測定

液相色譜儀HPLC化學發(fā)光檢測器的優(yōu)點

化學發(fā)光檢測器（ CD）是近年來發(fā)展起來的一種快速、靈敏的新型檢測器，具有設備簡單、價格低廉、線性范圍寬等優(yōu)點。
1靈敏度高

2選擇性好，僅對被測組分有響應

3樣品可直接分析，不需要前處理

4新型檢測器

5結構簡單

6線性范圍寬

3. 缺點
使用的反應氣或化學發(fā)光反應產物經常是危險性的氣體

在眾多的液相色譜儀HPLC檢測器中，化學發(fā)光檢測器(CLD)結構簡單，靈敏度高。在大多數情況下，它的靈敏度比紫外一可見光檢測器高2-3個數量級，由于它沒有光源，不存在散射光引起的背景，用于熒光物質檢測時，靈敏度比熒光檢測器更高，對某些物質的檢測甚至可與激光誘導熒光檢測器媲美，靈敏度可達10-21mol的單分子水平。將高靈敏度的化學發(fā)光檢測器與高分辨的高效液相色譜(HPLC)分離手段以適當的方式相禍合，集分離與分析之精華于一體，發(fā)展成為一種理想的分析方法。